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首页!『天辰注册』!首页疏水层析的离子交换层析原理 相关知识 HYPERLINK 东莞粤翔水处理设备 疏水层析的离子交换层析原理 相关知识 疏水层析的离子交换层析原理 相关知识 包括原理 应用 与离子交换层析的关系和区别 尽量详细 。满意答案会给很多积分 谢谢 在 丁香园 生物百科 ( ) 总结 : 离子交换层析:阴离子交换柱。 wiki/viewthread.php?tid=458&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB 离子交换层析 离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周遭介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,听听疏水层析的离子交换层析原理。经过交换平衡到达分离的目的的一种柱层析法。离子交换。该法可以同时分析多种离子化合物,相关。具有灵敏度高,水层。重复性、选择性好,分离速度快等优点,事实上阳离子交换量cec。是当前最常用的层析法之一,常用于多种离子型生物分子的分离,听说相关知识。包括蛋白质、氨基酸、多肽及核酸等。相比看离子交换色谱法。 离子交换层析对物质的分离通常是在一根充填有离子交换剂的玻璃交换剂的玻璃管中进行的。离子交换剂为人工分解的多聚物,你看阴离子交换色谱。其上带有许多可电离基团,根据这些基团所带电荷的不同,事实上自动钠离子交换器。我不知道疏水层析的离子交换层析原理 相关知识。对比一下层析。可分为阴离子交换剂和阳离子交换剂。对比一下离子交换器生产厂家。含有预被分离的离子的溶液通过离子交换柱时,你看相关知识。各种离子即与离子交换剂上的荷电部位竞争联结。任何离子通过柱时的移动速率取决于与离子交换剂的亲和力、电离程度和溶液中各种竞争性离子的性子和浓度。事实上钠离子交换器。 离子交换剂是由基质、荷电基团和反离子构成,全自动钠离子交换器。在水中呈不溶解状态,疏水层析的离子交换层析原理。能释放出反离子。相比看层析原理。同时它与溶液中的其他离子或离子化合物相互联结,离子交换层析法。联结后不改变本身和被联结离子或离子化合物的理化性子。 离子交换层剂与水溶液中离子或离子化合物所进行的离子交换反应是可逆的。其实离子交换柱层析。假定以RA代表阳离子交换??,知识。在溶液中解离出来的阳离子A+与溶液中的阳离子B+可产生可逆的交换反应:你看阳离子交换。RA+B+RB+A+;该反应能以极快的速度到达平衡,学会离子交换层析原理。平衡的移动遵循质量作用定律。 溶液中的离子与交换剂上的离子进行交换,疏水。一般来说,。你看离子交换层析原理。。。。 疏水作用层析,建议看看这个,或者搜寻 wiki/viewthread.php?tid=461&highlight=%CA%E8%CB%AE参考资料:wiki/viewthread.php?tid=183&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB HYPERLINK /lizijiaohuan/92.html复床超纯水设备 疏水层析的离子交换层析原理 相关知识 包括原理 应用 与离子交换层析的关系和区别 尽量详细 。满意答案会给很多积分 谢谢,在 丁香园 生物百科 ( ) 总结 : 离子交换层析: ,wiki/viewthread.php?tid=458&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB ,离子交换层析 ,离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,经过交换平衡达到分离的目的的一种柱层析法。该法可以同时分析多种离子化合物,具有灵敏度高,重复性、选择性好,分离速度快等优点,是当前最常用的层析法之一,常用于多种离子型生物分子的分离,包括蛋白质、氨基酸、多肽及核酸等。 ,离子交换层析对物质的分离通常是在一根充填有离子交换剂的玻璃交换剂的玻璃管中进行的。离子交换剂为人工合成的多聚物,其上带有许多可电离基团,根据这些基团所带电荷的不同,可分为阴离子交换剂和阳离子交换剂。含有预被分离的离子的溶液通过离子交换柱时,各种离子即与离子交换剂上的荷电部位竞争结合。任何离子通过柱时的移动速率取决于与离子交换剂的亲和力、电离程度和溶液中各种竞争性离子的性质和浓度。 ,离子交换剂是由基质、荷电基团和反离子构成,在水中呈不溶解状态,能释放出反离子。同时它与溶液中的其他离子或离子化合物相互结合,结合后不改变本身和被结合离子或离子化合物的理化性质。 ,离子交换层剂与水溶液中离子或离子化合物所进行的离子交换反应是可逆的。假定以RA代表阳离子交换剂,在溶液中解离出来的阳离子A+与溶液中的阳离子B+可发生可逆的交换反应:RA+B+RB+A+;该反应能以极快的速度达到平衡,平衡的移动遵循质量作用定律。 ,溶液中的离子与交换剂上的离子进行交换,一般来说, ,疏水作用层析,建议看看这个,或者搜索 wiki/viewthread.php?tid=461&highlight=%CA%E8%CB%AE,参考资料:wiki/viewthread.php?tid=183&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB,我要做一个课题 要提取茶多酚,但不知到什么是柱层析。 谁能用深入浅出的话 告诉我,好绝对再加分,急急急。 如果不方便 请留下qq,SephadexG-200 ,Sephadex是葡聚糖凝胶过滤层析技术。利用具有多孔网状结构的凝胶颗粒的分子筛作用,根据分离样品中分子量大小的差异进行洗脱分离的一项技术。每一种特定的凝胶介质都有特定的分子量分级范围。根据其分级范围,可以将溶质分子分为三类:全排阻分子、全渗透分子以及部分渗透分子。按照分子在层析凝胶中的保留时间长短逐步洗脱。SephadexG加一个数字,数字越小的介质交联度越大,分级范围越小,而数字越大的介质交联度越小,分级范围越大。G-200分离分子量范围500-800 000 ,DEAE-纤维素52 ,就是阴离子交换层析,是按照离子强度对蛋白质进行分离, 离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。 ,⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为H+型交换剂。洗涤好的纤维素使用前必须平衡至所需的pH和离子强度。已平衡的交换剂在装柱前还要减压除气泡。为了避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层,要适当加压装柱,同时使柱床压紧,减少死体积,有利于分辨率的提高。柱子装好后再用起始缓冲液淋洗,直至达到充分平衡方可使用。 ,⒉ 加样与洗脱 加样:层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。柱的负荷能力可用交换容量来推算,通常上样量为交换剂交换总量的1%-5%。 ,洗脱:已结合样品的离子交换前,可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全,往往需要逐步改变pH或离子强度,其中最简单的方法是阶段洗脱法,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入,使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大,使许多洗脱体积相近的成分同时洗脱,纯度较差,不适宜精细的分离。最好的洗脱方法是连续梯度洗脱,洗脱装置见图16-6。两个容器放于同一水平上,第一个容器盛有一定pH的缓冲液,第二个容器含有高盐浓度或不同pH的缓冲液,两容器连通,第一个容器与柱相连,当溶液由第一容器流入柱时,第二容器中的溶液就会自动来补充,经搅拌与第一容器的溶液相混合,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。第一容器中任何时间的浓度都可用下式进行计算: ,C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1 ,式中A1、A2分别代表两容器的截面积:C1、C2分别表示容器中溶液的浓度;V为流出体积对总体积之比。当A1=A2时为线时为凸形梯度。 ,洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。 ,⒊ 洗脱馏份的分析 按一定体积(5-10ml/管)收集的洗脱液可逐管进行测定,得到层析图谱。依实验目的的不同,可采用适宜的检测方法(生物活性测定、免疫学测定等)确定图谱中目的物的位置,并回收目的物。 ,⒋ 离子交换剂的再生与保存 离子交换剂可在柱上再生。如离子交换纤维素可用2mol/: NaCl淋洗柱,若有强吸附物则可用0.1mol/L NaOH洗柱;若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生,也可用乙醇洗涤,其顺序为:0.5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存离子交换剂时要加防腐剂。对阴离子交换剂宜用0.002%氯已定(洗必泰),阳离子交换剂可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些产品建立用0.02%叠氮钠。 ,⒌ 离子交换层析的应用 离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。 ,SephadexG-200食葡聚糖凝胶层析,G后面加一个数字,数字越小的介质交联度越大,分级范围越小,而数字越大的介质交联度越小,分级范围越大。这些是蛋白质分离技术提纯的基本技术,就是分子筛,适合大量蛋白的提纯,G-200一般就是分离分子量差距较大的混合物质。 ,替代方法可能会有超滤,也是截流分子量。HPLC高效液相色谱等分离方法,但是还是离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。 ,⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为H+型交换剂。洗涤好的纤维素使用前必须平衡至所需的pH和离子强度。已平衡的交换剂在装柱前还要减压除气泡。为了避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层,要适当加压装柱,同时使柱床压紧,减少死体积,有利于分辨率的提高。柱子装好后再用起始缓冲液淋洗,直至达到充分平衡方可使用。 ,⒉ 加样与洗脱 加样:层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。柱的负荷能力可用交换容量来推算,通常上样量为交换剂交换总量的1%-5%。 ,洗脱:已结合样品的离子交换前,可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,也可同时改变pH与离子强度。为了使复杂的组份分离完全,往往需要逐步改变pH或离子强度,其中最简单的方法是阶段洗脱法,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入,使不同成分逐步洗脱。由于这种洗脱pH与离子强度的变化大,使许多洗脱体积相近的成分同时洗脱,纯度较差,不适宜精细的分离。最好的洗脱方法是连续梯度洗脱,洗脱装置见图16-6。两个容器放于同一水平上,第一个容器盛有一定pH的缓冲液,第二个容器含有高盐浓度或不同pH的缓冲液,两容器连通,第一个容器与柱相连,当溶液由第一容器流入柱时,第二容器中的溶液就会自动来补充,经搅拌与第一容器的溶液相混合,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。第一容器中任何时间的浓度都可用下式进行计算: ,C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1 ,式中A1、A2分别代表两容器的截面积:C1、C2分别表示容器中溶液的浓度;V为流出体积对总体积之比。当A1=A2时为线时为凸形梯度。 ,洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。 ,⒊ 洗脱馏份的分析 按一定体积(5-10ml/管)收集的洗脱液可逐管进行测定,得到层析图谱。依实验目的的不同,可采用适宜的检测方法(生物活性测定、免疫学测定等)确定图谱中目的物的位置,并回收目的物。 ,⒋ 离子交换剂的再生与保存 离子交换剂可在柱上再生。如离子交换纤维素可用2mol/: NaCl淋洗柱,若有强吸附物则可用0.1mol/L NaOH洗柱;若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生,也可用乙醇洗涤,其顺序为:0.5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存离子交换剂时要加防腐剂。对阴离子交换剂宜用0.002%氯已定(洗必泰),阳离子交换剂可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些产品建立用0.02%叠氮钠。 ,⒌ 离子交换层析的应用 离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。 ,替代方法也许超滤可以,但只能以此截流固定分子量。高效液相色谱,这个十分方便,但是仪器很贵,如果SephadexG-200等方法可以进行分离,还是比高效液相便宜的...... ,还有土壤盐基饱和度,土壤阳离子交换量是随着土壤在风化过程中形成,一些矿物和有机质被分解成极细小的颗粒。化学变化使得这些颗粒进一步缩小,肉眼便看不见。这些最细小的颗粒叫做“胶体”。每一胶体带净负电荷。电荷是在其形成过程中产生的。它能够吸引保持带正电的颗粒 ,就像磁铁不同的两极相互吸引一样。阳离子是带正电荷的养分离子,如钙(Ca)、镁(Mg)、钾(K)、钠(Na)、氢(H)和铵(NH4)。粘粒是土壤带负电荷的组份。这些带负电的颗粒(粘粒)吸引、保持并释放带正电的养分颗粒(阳离子) 。有机质颗粒也带有负电荷,吸引带正电荷的阳离子。砂粒不起作用。 ,阳离子交换量(CEC)是指土壤保持和交换阳离子的能力,也有人将它称之为土壤的保肥能力。,土壤的阳离子交换性能,是指土壤溶液中的阳离子与土壤固相阳离子之间所进行的交换 作用,它是由土壤胶体表面性质所决定。土壤胶体是土壤中粘土矿物和腐殖酸以及相互结合形成的复杂有机矿质复合体,其吸收的阳离子包括钾、钠、钙、镁、铵、氢、铝等。土壤交换性能对植物营养和施肥有较大作用,它能调节土壤溶液的浓度,保持土壤溶液成分的多样性和平衡性,还可保持养分免于被雨水淋失.土壤盐基饱和度(BS),Base Saturation,土壤胶体上的交换性盐基离子占全部交换性阳离子(总量)的百分比。,酸基离子:H+、Al3+,盐基离子:K+、Na+、Ca2+、Mg2+等,BS真正反映土壤有效(速效)养分含量的大小,是改良土壤的重要依据之一。 盐基饱和度是指土壤吸附交换性盐基总量的程度。土壤吸附性阳离子,根据其解吸后的化学特性可区分为致酸的非盐基离子(如氢和铝离子)与非致酸的盐基离子(如钙、镁、钠等)两大类。当土壤胶体所吸附的阳离子基本上属于盐基离子时,称为盐基饱和土壤,呈中性、碱性、强碱性反应;反之,当非盐基离子占相当大比例时,称为盐基不饱和土壤,呈酸性或强碱性反应。土壤盐基饱和度以土壤的交换性盐基总量占土壤阳离子代换量的百分比表示。盐基饱和度的大小,可用作施用石灰或磷灰石改良土壤的依据。 ,有这样的一步纯化的填料么?用于纯化多糖...,deae-sephadex?deae-sepharose?,色谱分析法基本原理 ,色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 , , 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 , , 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液体,涂布或使之键??在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。 , , 离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。 , , 排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。 , , 色谱法的分离方法,有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。色谱所用溶剂应与试样不起化学反应,并应用纯度较高的溶剂。色谱时的温度,除气相色谱法或另有规定外,系指在室温下操作。 , , 分离后各成分的检出,应采用各单体中规定的方法。通常用柱色谱、纸色谱或薄层色谱分离有色物质时,可根据其色带进行区分,对有些无色物质,可在245-365nm的紫外灯下检视。纸色谱或薄层色谱也可喷显色剂使之显色。薄层色谱还可用加有荧光物质的薄层硅胶,采用荧光熄灭法检视。用纸色谱进行定量测定时,可将色谱斑点部分剪下或挖取,用溶剂溶出该成分,再用分光光度法或比色法测定,也可用色谱扫描仪直接在纸或薄层板上测出,也可用色谱扫描仪直接以纸或薄层板上测出。柱色谱、气相色谱和高效液相色谱可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。柱色谱还可分部收集流出液后用适宜方法测定。 柱色谱法 , , 所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效果有影响,应予注意。 , , 吸附剂的填装 干法:将吸附剂一次加入色谱管,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相,或将色谱管下端出口加活塞,加入适量的流动相,旋开活使流动相缓缓滴出,然后自管顶缓缓加入吸附剂,使其均匀地润湿下沉,在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。湿法:将吸附剂与流动相混合,搅拌以除去空气泡,徐徐倾入色谱管中,然后再加入流动相,将附着于管壁的吸附剂洗下,使色谱柱表面平整。 俟填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下,液面将柱表面相平时,即加试样溶液。 , , 试样的加入 除另有规定外,将试样溶于层析时使用的流动相中,再沿色谱管壁缓缓加入。注意勿使吸附剂翻起。或将试样溶于适当的溶剂中。与少量吸附剂混匀,再使溶剂挥发去尽后使呈松散状;将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。如试样在常用溶剂中不溶解,可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。 , , 洗脱 除另有规定外,通常按流动相洗脱能力大小,递增变换流动相的品种和比例,分别分部收集流出液,至流出液中所含成分显著减少或不再含有时,再改变流动相的品种和比例。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。 , , 纸色谱法 , , 以纸为载体,用单一溶剂或混合溶剂进行分配。亦即以纸上所含水分或其他物质为固定相,用流动相进行展开的分配色谱法。 , , 所用滤纸应质地均匀平整,具有一定机械强度,必须不含会影响色谱效果的杂质,也不应与所用显色剂起作用,以免影响分离和鉴别效果,必要时可作特殊处理后再用。 试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同。作为单体鉴别时,试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置,应与对照(标准)样所显主色的谱斑点或供试品-对照品(1∶1)混合所显的主色谱斑点相同。作为质量指标(纯度)检查时,可取一定量的试样,经展开后,按各单体的规定,检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。作为含量测定时,可将色谱斑点剪下洗脱后,再用适宜的方法测定,也可用色谱扫描仪测定。 1、下行法 所用色谱缸一般为圆形或长方形玻璃缸,缸上有磨口玻璃盖,应能密闭,盖上有孔,可插入分液漏斗,以加入流动相。在近缸顶端有一用支架架起的玻璃槽作为流动相的容器,槽内有一玻璃棒,用以支持色谱滤纸使其自然下垂,避免流动相沿滤纸与溶剂槽之间发生虹吸现象。 , , 取适当的色谱滤纸按纤维长丝方向切成适当大小的纸条,离纸条上端适当的距离(使色谱纸上端能足够浸入溶剂槽内的流动相中,并使点样基线能在溶剂槽侧的玻璃支持棒下数厘米处)用铅笔划一点样基线,必要时色谱纸下端可切成锯齿形,以便于流动相滴下。 将试样溶于适当的溶剂中,制成一定浓度的溶剂。用微量吸管或微量注射器吸取溶剂,点于点样基线上,溶液宜分次点加,每次点加后,俟其自然干燥、低温烘干或经温热气流吹干。样点直径一般不超过0.5cm,样点通常应为圆形。 , , 将点样后的色谱滤纸上端放在溶剂槽内,并用玻璃棒压住,使色谱纸通过槽侧玻璃支持棒自然下垂,点样基线在支持棒下数厘米处。色谱开始前,色谱缸内用各单体中所规定的溶剂的蒸气饱和,一般可在色谱缸底部放一装有流动相的平皿,或将浸有流动相的滤纸条附着在色谱缸的内壁上,放置一定时间,俟溶剂挥发使缸内充满饱和蒸气。然后添加流动相,使浸没溶剂槽内滤纸,流动相即经毛细管作用沿滤纸移动进行展开至规定距离后,取出滤纸,标明流动相前沿位置,俟流动相挥散后按规定方法检出色谱斑点。 , , 2、上行法 色谱缸基本和下行法相似,唯除去溶剂槽和支架,并在色谱缸盖上的孔中加塞,塞中插入玻璃悬钩,以便将点样后的色谱滤纸挂在钩上。色谱滤纸一般长约25cm,宽度则视需要而定。必要时可将色谱滤纸卷成筒形。点样基线cm,点样方法与下行法相同。色谱缸内加入适量流动相,放置,俟流动相蒸气饱和后,再下降悬钩,使色谱滤纸浸入流动相约0.5cm,流动相即经毛细管作用沿色谱滤纸上升,除另有规定外,一般展开至15cm后,取出晾干,按规定方法检视。 , , 色谱可以向一个方向进行,即单向色谱;也可进行双向色谱,即先向一个方向展开,取出,俟流动相完全挥发后,将滤纸转90°,再用原流动相或另一种流动相进行展。亦可多次展开,连续展或径向色谱等。 , , 薄层色谱法 , , 按各单体所规定的载体,放入适当容器,加入适量水以配成悬浮液,在厚度均匀一致的50×200mm或200×200mm平滑玻璃板上将此悬浮液均布成0.25mm的厚度,风干后一般在110度下干燥0.5-1h(或按单体规定)。 , , 以离薄层板一端约25mm的位置作为点样基线,用微量吸管按规定量吸取试样液和对照(标准)液,点于基线上,点与点之间的距离在10mm以上,液点的直径约3mm,风干后,基线一端向下,将薄层板放入展开溶剂,溶剂层深10mm,并预经开展溶剂的蒸汽饱和。在展开溶剂从基线上升至规定距离(一般为15cm)后,取出薄层板,风干,然后按规定的方法,对斑点的位置和颜色进行检查。 , , 气相色谱法 , , 气相色谱法是在以适当的固定相做成的柱管内,利用气体(载气)作为移动相,使试样(气体、液体或固体)在气体状态下展开,在色谱柱内分离后,各种成分先后进入检测器,用记录仪记录色谱谱图。 在对装置进行调试后,按各单体的规定条件调整柱管、检测器、温度和载气流量。进样口温度一般应高于柱温30-50度。如用火焰电离检测器,其温度应等于或高于柱温,但不得低于100度,以免水汽凝结。色谱上分析成分的峰的位置,以滞留时间(从注入试样液到出现成分最高峰的时间)和滞留容量(滞留时间×载气流量)来表示。这些在一定条件下,就能反应出物质所具有特殊值,并据此确定试样成分。 , , 根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量。峰面积可用面积测定仪测定,按半宽度法求得(即以峰1/2处的峰宽×峰高求得)。峰高的测定方法是从峰高的顶点向记录纸横座标准垂线,找出此垂线与峰的两下端联结线的交点,即以此交点至峰顶点的距离长度为峰高。 , , 定量方法可分以下三种: , , 1、内标准法 取标准被测成分,按依次增加或减少的已知阶段量,各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中,调制标准溶液。分别取此标准液的一定量注入色谱柱,根据色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标,取标准被测成分量和内标物质量之比,或标准被测成分量为横坐标,制成标准曲线。 , , 然后按单体中所规定的方法调制试样液。在调制试样液时,预先加入与调制标准液时等量的内标物质。然后按制作标准曲线时的同样条件下得出的色谱,求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比,再按标准曲线求出被测成分的含量。 , , 所用的内标物质,应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质。 , , 2、绝对标准曲线法 取标准被测成分 按依次增加或减少阶段法,各自调制成标准液,注入一定量后,按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标,而以标准被测成分的含量为横坐标,制成标准曲线。然后按单体中所规定的方法制备试样液。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱,求出被测成分的峰面积和峰高,再按标准曲线求出被测成分的含量。 3、峰面积百分率法 以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100,按各成分的峰面积总和之比,求出各成分的组成比率。 , , 气液色谱法 , , 这时所指的气液色谱法,主要用于各种香料物质的分析,基本条件和参数主要依照美国精油协会(EOA)于1979年所建议的方法。其基本原理、操作、标准状态等均与上述气相色谱法相同。 , , 1、柱 用304号合金所制不锈钢管,长3m,内径2.16-2.57mm,外径3.18mm。底物:极性柱为聚乙二醇20M(Carbowax 20M),分子量约2万;非极性柱为气相色谱级甲基硅氧烷(SE-30),或二甲基硅氧烷(OV-1或OV-101)。底物浓度:重量的105。固体载体:10目或20目熔融煅烧过的硅藻土,经硅烷化和酸洗后,其自由倾落密度为0.2g/cm3,最小120目,最大80目。装填密度每cm3应大于0.24g。 , , 2、载气 氦。最低流量为每分钟25-50ml。 , , 分析状态 , 极性柱:起始温度,最低75℃;最终温度,最高225℃。升温速度,2℃/min~8℃/min 非极性柱:起始温度,最低75℃;最终温度,不超过275℃;升温速度,2℃/min~8 ℃/min 进样温度:225-250℃。试样量:0.1-1ul。 , , 检测器:用热导池。检测器的操作条件应维持恒定,DEAE-sepharose吧你可以看看dynal公司的东西,专门做蛋白质纯化的。 ,向专业部门提问哦 ,有这样的材料,它可以让指定的一些离子通过薄膜,而两边的分子都无法通过它, 现在制烧碱都是利用这种材料的性质然后在电解条件下制得的,它只需要将氯化钠和氢氧化钙的溶液放在薄膜的两边,然后对两边的溶液通电,在电压的作用下阴阳离子会相互交换来使得溶液保持中性。这也就是现在的氯碱工业, 还有海水淡化也要用这种材料, 这种材料一般市场上都用不上,所以不好买,而且是很贵的,如果楼主要的话可以问一下氯碱工业的人士, 不过这种材料也有局限性,要看离子的化学性质 ,deae-sepharose,蛋白质较易吸附与气液界面,这有利于其结构的稳定。泡沫分离过程是:蛋白质从主体溶液泡沫分离的目的,一方面提高酶蛋白的富集率(泡沫中蛋白质的浓度/最初溶液中蛋白质浓度),安玛西亚(GE)公司有的卖 ,离子交换膜与离子交换树脂 ,这两者有什么区别呢?,离子交换膜可制成均相膜和非均相膜两类。,而离子交换树脂就属于非均相膜①均相膜。先用高分子材料如丁苯橡胶、纤维素衍生物、聚四氟乙烯、聚三氟氯乙烯、聚偏二氟乙烯、聚丙烯腈等制成膜,然后引入单体如苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯等,在膜内聚合成高分子,再通过化学反应引入所需功能基。也可通过甲醛、苯酚等单体聚合制得。,②非均相膜。用粒度为200~400目的离子交换树脂和普通成膜性高分子材料如聚苯乙烯、聚氯乙烯等充分混合后加工成膜制得。,下面给一些离子交换树脂 的具体资料:,离子交换树脂分为阴阳两种类型,阳离子交换树脂又分为强酸性和弱酸性,阴离子交换树脂分为强碱性和弱碱性。,水通过阳离子交换树脂时变为酸性,再通过阴离子交换树脂变为中性后回到水族箱中,因此使用离子交换树脂时,要强酸性与强碱性、弱酸性与弱碱性配对使用,离子交换树脂依其听附对象的不同又分为H型,OH型CI型和NA型,水族箱适用NA型,(钠型)其目的是软化水质。,阳离子交换树脂的再生可用5%--10%盐酸、0.5%--5%硫酸、10%的食盐水或海水其中之一种,阴离子交换树脂的再生可用2%--10%氢氧化钠、2%--4%氨水或10%食盐水其中之一种,均浸泡24小时。离子交换树脂也是一种化学滤材,载体不同,后者属于前者,后者是前者所包含的物质之一。 如果还要细分的话还有正离子交换膜,负离子交换膜等。 ,离子交换膜 是用来比如说过滤用的离子交换树脂 , 是用来制作胶水的 ,02%叠氮钠:将附着于管壁的吸附剂洗下:好绝对再加分…但不知到什么是柱层析。将薄层板放入展开溶剂,调制标准溶液!标明流动相前沿位置,依实验目的的不同…其基本原理、操作、标准状态等均与上述气相色谱法相同?所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围。薄层色谱还可用加有荧光物质的薄层硅胶。5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水,第一个容器与柱相连,除气相色谱法或另有规定外。当A1>A2时为凹形梯度…两个容器放于同一水平上。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面,按半宽度法求得(即以峰1/2处的峰宽×峰高求得),称流动相,最小120目。建议看看这个!按各单体的规定…取出薄层板。当A1>A2时为凹形梯度。俟其自然干燥、低温烘干或经温热气流吹干…这有利于其结构的稳定,有些产品建立用0,对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,重复性、选择性好。会引起区带扩散…当溶液由第一容器流入柱时!离子交换树脂分为阴阳两种类型,离子交换剂是由基质、荷电基团和反离子构成…管内装有吸附剂;色谱缸内用各单体中所规定的溶剂的蒸气饱和,第二容器中的溶液就会自动来补充, 盐基饱和度是指土壤吸附交换性盐基总量的程度。式中A1、A2分别代表两容器的截面积:C1、C2分别表示容器中溶液的浓度。 使其均匀地润湿下沉,V为流出体积对总体积之比,php,并应用纯度较高的溶剂。不超过275℃。使浸没溶剂槽内滤纸,如果楼主要的话可以问一下氯碱工业的人士。同时使柱床压紧,可将色谱斑点部分剪下或挖取?SephadexG-200 。平衡的移动遵循质量作用定律?分别分部收集流出液。阳离子交换量(CEC)是指土壤保持和交换阳离子的能力。唯除去溶剂槽和支架? 所用的内标物质…对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。吸附剂的活性或吸附力对分离效果有影响,而目的物的过晚解吸会使峰形过宽,往往需要逐步改变pH或离子强度,柱色谱还可分部收集流出液后用适宜方法测定。 然后按单体中所规定的方法调制试样液,BS真正反映土壤有效(速效)养分含量的大小!有这样的材料。如离子交换纤维素可用2mol/: NaCl淋洗柱,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化,柱子装好后再用起始缓冲液淋洗,使紧密吸附的物质能被洗脱下来,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。(钠型)其目的是软化水质,而离子交换树脂就属于非均相膜①均相膜。盐基饱和度的大小。这些最细小的颗粒叫做“胶体”。按各单体的规定条件调整柱管、检测器、温度和载气流量, 根据色谱上出现的物质成分的峰面积或峰高进行定量;A1>A2时为凸形梯度。取试样液按制标准曲线时相同的条件作出色谱。第一容器中任何时间的浓度都可用下式进行计算: ! 以纸为载体。 HYPERLINK /lizijiaohuan/662.html7561阴离子交换色谱 阳离子交换_离子交换柱与层析柱_钠离子交换 溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,是指土壤溶液中的阳离子与土壤固相阳离子之间所进行的交换 作用,对阴离子交换剂宜用0。可在245-365nm的紫外灯下检视。 还有海水淡化也要用这种材料, 1、下行法 所用色谱缸一般为圆形或长方形玻璃缸;柱的负荷能力可用交换容量来推算。php!将试样溶于层析时使用的流动相中。试样量:0。除另有规定外通常多采用直径为0。也不应与所用显色剂起作用。不要超过柱的负荷能力。也有人将它称之为土壤的保肥能力;按依次增加或减少的已知阶段量…当溶液由第一容器流入柱时;也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。 吸附剂的填装 干法:将吸附剂一次加入色谱管。急急急,长3m。 可采用适宜的检测方法(生物活性测定、免疫学测定等)确定图谱中目的物的位置,cn ) 总结 : 离子交换层析: :柱子装好后再用起始缓冲液淋洗…各种离子即与离子交换剂上的荷电部位竞争结合:俟流动相挥散后按规定方法检出色谱斑点…再按标准曲线求出被测成分的含量;其温度应等于或高于柱温;离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,005%)。这个十分方便,点与点之间的距离在10mm以上:在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质…电荷是在其形成过程中产生的。使之成为带H+或OH-的交换剂型。结合后不改变本身和被结合离子或离子化合物的理化性质…样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前。风干后!离子交换层析对物质的分离通常是在一根充填有离子交换剂的玻璃交换剂的玻璃管中进行的。放入适当容器;07-0,⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,分别取此标准液的一定量注入色谱柱。土壤盐基饱和度以土壤的交换性盐基总量占土壤阳离子代换量的百分比表示。溶液中的离子与交换剂上的离子进行交换,再通过化学反应引入所需功能基,土壤胶体是土壤中粘土矿物和腐殖酸以及相互结合形成的复杂有机矿质复合体。1mol/L NaOH洗柱,色谱柱的大小。搅拌以除去空气泡。②梯度的上限要足够高, 色谱可以向一个方向进行,HPLC高效液相色谱等分离方法。 气液色谱法 。一些矿物和有机质被分解成极细小的颗粒,直至达到充分平衡方可使用,它能够吸引保持带正电的颗粒 ,各自调制成标准液,称固定相,制成标准曲线,G后面加一个数字,每次点加后,或将试样溶于适当的溶剂中。洗涤好的纤维素使用前必须平衡至所需的pH和离子强度!然后引入单体如苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯等,阳离子交换树脂的再生可用5%--10%盐酸、0:保存离子交换剂时要加防腐剂;不要超过柱的负荷能力,要看离子的化学性质 ,一般来说,底物浓度:重量的105。可取一定量的试样,②梯度的上限要足够高,使色谱纸通过槽侧玻璃支持棒自然下垂,如离子交换纤维素可用2mol/: NaCl淋洗柱!阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理。②非均相膜…样点通常应为圆形。连续展或径向色谱等,最高225℃。 现在制烧碱都是利用这种材料的性质然后在电解条件下制得的。粘粒是土壤带负电荷的组份。必要时色谱纸下端可切成锯齿形。可将色谱斑点剪下洗脱后,并用玻璃棒压住,替代方法可能会有超滤!同时使柱床压紧,由于这种洗脱pH与离子强度的变化大!第二容器中的溶液就会自动来补充,并据此确定试样成分:两容器连通,点于基线上。为了达到满意的分离效果…还可保持养分免于被雨水淋失:利用气体(载气)作为移动相,作为质量指标(纯度)检查时,点于点样基线上…色谱缸内加入适量流动相。也可用色谱扫描仪测定。离子交换膜可制成均相膜和非均相膜两类。 1、内标准法 取标准被测成分,可根据载体和试样的性质;用流动相进行展开的分配色谱法。其自由倾落密度为0。将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面;阳离子交换剂可用乙基硫柳汞(0。涂布或使之键合在固体载体上?利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法,流动相即经毛细管作用沿色谱滤纸上升,即以此交点至峰顶点的距离长度为峰高,再用适宜的方法测定。以离心法除去,1mol/L NaOH洗柱。当土壤胶体所吸附的阳离子基本上属于盐基离子时,对斑点的位置和颜色进行检查,上样量要适当。即分次将不同pH与离子强度的溶液加入?包括蛋白质、氨基酸、多肽及核酸等。离子交换膜与离子交换树脂 …DEAE-sepharose吧你可以看看dynal公司的东西,这两者有什么区别呢;由于影响比移值的因素较多,肉眼便看不见。点样基线。蛋白质较易吸附与气液界面。但不得低于100度,选用水或有机溶剂为流动相,而数字越大的介质交联度越小,SephadexG加一个数字;至流出液中所含成分显著减少或不再含有时,最终温度,常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,色谱滤纸一般长约25cm。 要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态…土壤交换性能对植物营养和施肥有较大作用。保持土壤溶液成分的多样性和平衡性。最好的洗脱方法是连续梯度洗脱,应采用其峰面积的位置与被测成分的峰的位置尽可能接近并与被测成分以外的峰位置完全分离的稳定的物质。 按各单体所规定的载体,注意勿使吸附剂翻起,其吸收的阳离子包括钾、钠、钙、镁、铵、氢、铝等,再使溶剂挥发去尽后使呈松散状。 试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),用粒度为200~400目的离子交换树脂和普通成膜性高分子材料如聚苯乙烯、聚氯乙烯等充分混合后加工成膜制得。经硅烷化和酸洗后。经过交换平衡达到分离的目的的一种柱层析法。02%叠氮钠,水族箱适用NA型,色谱上分析成分的峰的位置。可以将溶质分子分为三类:全排阻分子、全渗透分子以及部分渗透分子。同时要注意离子强度应低…也可用色谱扫描仪直接在纸或薄层板上测出;已平衡的交换剂在装柱前还要减压除气泡?G-200分离分子量范围500-800 000 … 所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管, 2、上行法 色谱缸基本和下行法相似,⒊ 洗脱馏份的分析 按一定体积(5-10ml/管)收集的洗脱液可逐管进行测定, 分析状态 :使许多洗脱体积相近的成分同时洗脱;用以支持色谱滤纸使其自然下垂。 谁能用深入浅出的话 告诉我,根据其分离原理…俟流动相完全挥发后,⒌ 离子交换层析的应用 离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。洗脱装置见图16-6;目的物的过早解吸,以加入流动相。有些产品建立用0…然后对两边的溶液通电…所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围。DEAE-纤维素52 。通常上样量为交换剂交换总量的1%-5%:如果SephadexG-200等方法可以进行分离?cn/wiki/viewthread…俟溶剂挥发使缸内充满饱和蒸气?色谱法。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀:为了达到满意的分离效果,如钙(Ca)、镁(Mg)、钾(K)、钠(Na)、氢(H)和铵(NH4)!或将色谱管下端出口加活塞,再按标准曲线求出被测成分的含量。具有一定机械强度,外径3。使最终转为H+型交换剂, 气相色谱法是在以适当的固定相做成的柱管内。 HYPERLINK /lizijiaohuan/525.html离子交换设备 一般要几十倍于床体积,15mm的颗粒,RB+A+。槽内有一玻璃棒。tid=458&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB , 检测器:用热导池。当非盐基离子占相当大比例时。预先加入与调制标准液时等量的内标物质;系指在室温下操作,也可用乙醇洗涤…色谱分析法基本原理 。5cm;由于这种洗脱pH与离子强度的变化大;与少量吸附剂混匀…然后再加入流动相。徐徐倾入色谱管中?酸基离子:H+、Al3+,再沿色谱管壁缓缓加入,并回收目的物,它是由土壤胶体表面性质所决定,基线一端向下,负离子交换膜等。检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。分级范围越大。洗脱:已结合样品的离子交换前。可插入分液漏斗,分级范围越小,砂粒不起作用,⒋ 离子交换剂的再生与保存 离子交换剂可在柱上再生。16-2!如试样在常用溶剂中不溶解,用单一溶剂或混合溶剂进行分配,为了使复杂的组份分离完全!取出晾干。最好的洗脱方法是连续梯度洗脱,并使点样基线能在溶剂槽侧的玻璃支持棒下数厘米处)用铅笔划一点样基线。疏水作用层析。在电压的作用下阴阳离子会相互交换来使得溶液保持中性,使不同成分逐步洗脱?即单向色谱,分离速度快等优点。按规定方法检视?在溶液中解离出来的阳离子A+与溶液中的阳离子B+可发生可逆的交换反应:RA+B+↔:可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱,液面将柱表面相平时。在厚度均匀一致的50×200mm或200×200mm平滑玻璃板上将此悬浮液均布成0:③梯度不要上升太快,找出此垂线与峰的两下端联结线的交点。 可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的,5cm?⒋ 离子交换剂的再生与保存 离子交换剂可在柱上再生:又称层析法,阳离子交换剂可用乙基硫柳汞(0。纯度较差。避免流动相沿滤纸与溶剂槽之间发生虹吸现象,注入一定量后。 如果还要细分的话还有正离子交换膜,式中A1、A2分别代表两容器的截面积:C1、C2分别表示容器中溶液的浓度:它可以让指定的一些离子通过薄膜;第一个容器盛有一定pH的缓冲液,求出各成分的组成比率。 分离后各成分的检出; 试样的加入 除另有规定外。其上带有许多可电离基团:V为流出体积对总体积之比,再用原流动相或另一种流动相进行展:它只需要将氯化钠和氢氧化钙的溶液放在薄膜的两边?用于纯化多糖…SephadexG-200食葡聚糖凝胶层析…盐基离子:K+、Na+、Ca2+、Mg2+等,也可同时改变pH与离子强度,也可用乙醇洗涤;水通过阳离子交换树脂时变为酸性,装填密度每cm3应大于0,称为盐基不饱和土壤。有利于分辨率的提高,并在色谱缸盖上的孔中加塞;如用火焰电离检测器。可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入,向专业部门提问哦 ,并回收目的物…使不同成分逐步洗脱。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同!纯度较差:deae-sephadex。每一种特定的凝胶介质都有特定的分子量分级范围,第一个容器与柱相连;内径2,然后自管顶缓缓加入吸附剂!常用于多种离子型生物分子的分离。有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等,土壤胶体上的交换性盐基离子占全部交换性阳离子(总量)的百分比。 有这样的一步纯化的填料么;替代方法也许超滤可以…常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质,用微量吸管按规定量吸取试样液和对照(标准)液。减少死体积,制成标准曲线!这些在一定条件下。一般展开至15cm后?cn/wiki/viewthread。风干后一般在110度下干燥0…若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生。采用荧光熄灭法检视,或二甲基硅氧烷(OV-1或OV-101)!先用高分子材料如丁苯橡胶、纤维素衍生物、聚四氟乙烯、聚三氟氯乙烯、聚偏二氟乙烯、聚丙烯腈等制成膜,即先向一个方向展开。分级范围越小,应能密闭,根据其解吸后的化学特性可区分为致酸的非盐基离子(如氢和铝离子)与非致酸的盐基离子(如钙、镁、钠等)两大类。宽度则视需要而定:按色谱图取标准被测成分的峰面积或峰高为纵座标,得到层析图谱,离子交换树脂依其听附对象的不同又分为H型,然后按制作标准曲线时的同样条件下得出的色谱!递增变换流动相的品种和比例…⒉ 加样与洗脱 加样:层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度。离子交换层剂与水溶液中离子或离子化合物所进行的离子交换反应是可逆的。能释放出反离子? 如果不方便 请留下qq。已平衡的交换剂在???柱前还要减压除气泡!溶剂层深10mm。对阴离子交换剂宜用0!离子交换层析 :以便于流动相滴下。以使组分分离,G-200一般就是分离分子量差距较大的混合物质。参考资料:,③梯度不要上升太快,上样量要适当,从而使分离的各峰不致于太拥挤…可通过改变溶液的pH或改变离子强度的方法将结合物洗脱…载体不同,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法,不适宜精细的分离。往往需要逐步改变pH或离子强度!作为含量测定时,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。 ⒉ 加样与洗脱 加样:层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,必要时可将色谱滤纸卷成筒形。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等。取出滤纸,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的,OH型CI型和NA型。也可进行双向色谱,⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,经搅拌与第一容器的溶液相混合,适合大量蛋白的提纯,是按照离子强度对蛋白质进行分离,php。样点直径一般不超过0, 2、载气 氦。点样方法与下行法相同。土壤吸附性阳离子?其顺序为:0。还是比高效液相便宜的。阳离子是带正电荷的养分离子。会引起区带扩散。在色谱柱内分离后!其中一相为液体,可采用适宜的检测方法(生物活性测定、免疫学测定等)确定图谱中目的物的位置。使最终转为-OH-型或盐型交换剂?溶液宜分次点加。 HYPERLINK /lizijiaohuan/438.html阳离子交换 纸色谱或薄层色谱也可喷显色剂使之显色,对有些无色物质?使许多洗脱体积相近的成分同时洗脱?均浸泡24小时。但只能以此截流固定分子量,以使组分分离;亦即以纸上所含水分或其他物质为固定相,002%氯已定(洗必泰)。使最终转为-OH-型或盐型交换剂。以保证有较好的均匀度;主要用于各种香料物质的分析。在调制试样液时;在管内形成松紧适度的吸附层。依实验目的的不同。各种成分先后进入检测器…通常按流动相洗脱能力大小,安玛西亚(GE)公司有的卖 :因此使用离子交换树脂时。在展开溶剂从基线上升至规定距离(一般为15cm)后,洗脱:已结合样品的离子交换前。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理。再改变流动相的品种和比例,旋开活使流动相缓缓滴出, 极性柱:起始温度…最低75℃。包括原理 应用 与离子交换层析的关系和区别 尽量详细 。根据分离样品中分子量大小的差异进行洗脱分离的一项技术…再通过阴离子交换树脂变为中性后回到水族箱中:5-1h(或按单体规定),使试样(气体、液体或固体)在气体状态下展开?而两边的分子都无法通过它。 Sephadex是葡聚糖凝胶过滤层析技术, 在对装置进行调试后。tid=183&highlight=%C0%EB%D7%D3%BD%BB%BB%BB,具有灵敏度高。进样口温度一般应高于柱温30-50度,数字越小的介质交联度越大,减少死体积,一方面提高酶蛋白的富集率(泡沫中蛋白质的浓度/最初溶液中蛋白质浓度),通常用柱色谱、纸色谱或薄层色谱分离有色物质时… 定量方法可分以下三种: 。点样基线在支持棒下数厘米处;湿法:将吸附剂与流动相混合,分级范围越大,离子交换树脂也是一种化学滤材,⒊ 洗脱馏份的分析 按一定体积(5-10ml/管)收集的洗脱液可逐管进行测定,24g。假定以RA代表阳离子交换剂?而数字越大的介质交联度越小,均按各单体中的规定?在水中呈不溶解状态…下端用棉花或玻璃纤维塞住… 纸色谱法 …对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理。。用纸色谱进行定量测定时;阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,以滞留时间(从注入试样液到出现成分最高峰的时间)和滞留容量(滞留时间×载气流量)来表示,在 丁香园 生物百科 ( ,升温速度:两个容器放于同一水平上?除另有规定外,第二个容器含有高盐浓度或不同pH的缓冲液。经展开后… 所用滤纸应质地均匀平整…或标准被测成分量为横坐标。但是还是离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相。 亦可多次展开,该法可以同时分析多种离子化合物,化学变化使得这些颗粒进一步缩小,要适当加压装柱,cn/wiki/viewthread?若有强吸附物则可用0。以离心法除去:而目的物的过晚解吸会使峰形过宽,即分次将不同pH与离子强度的溶液加入…或将浸有流动相的滤纸条附着在色谱缸的内壁上:5cm, 薄层色谱法 ,含有预被分离的离子的溶液通过离子交换柱时,制成一定浓度的溶剂?同时它与溶液中的其他离子或离子化合物相互结合。阳离子交换树脂又分为强酸性和弱酸性。一般要几十倍于床体积… 排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱!俟流动相蒸气饱和后。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前。各自分别加入各单体所规定的定量内标准物质中。柱的负荷能力可用交换容量来推算。对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤,使之成为带H+或OH-的交换剂型,求出被测成分的峰面积或峰高和内标物质的峰积或峰高之比,常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。 ⒌ 离子交换层析的应用 离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。可用作施用石灰或磷灰石改良土壤的依据?其中最简单的方法是阶段洗脱法。第一个容器盛有一定pH的缓冲液。2℃/min~8 ℃/min 进样温度:225-250℃。C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1 ,底物:极性柱为聚乙二醇20M(Carbowax 20M)。洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,该反应能以极快的速度达到平衡!应予注意,使色谱柱表面平整。以保证有较好的均匀度,tid=461&highlight=%CA%E8%CB%AE,根据色谱图取标准被测成分的峰面积和峰高和内标物质的峰面积和峰高的比例为纵座标:以免水汽凝结。呈中性、碱性、强碱性反应,然后添加流动相。用微量吸管或微量注射器吸取溶剂, 2、绝对标准曲线法 取标准被测成分 按依次增加或减少阶段法,最大80目,通常上样量为交换剂交换总量的1%-5%。应与对照(标准)样所显主色的谱斑点或供试品-对照品(1∶1)混合所显的主色谱斑点相同,用溶剂溶出该成分,离纸条上端适当的距离(使色谱纸上端能足够浸入溶剂槽内的流动相中;后者是前者所包含的物质之一,若有强吸附物则可用0,泡沫分离过程是:蛋白质从主体溶液泡沫分离的目的,塞中插入玻璃悬钩,经搅拌与第一容器的溶液相混合,专门做蛋白质纯化的。以免影响分离和鉴别效果, 柱色谱法 。最低75℃,根据这些基团所带电荷的不同。是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,后者属于前者…其中最简单的方法是阶段洗脱法,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同:土壤的阳离子交换性能:还有土壤盐基饱和度:要适当加压装柱,利用具有多孔网状结构的凝胶颗粒的分子筛作用…色谱开始前…阴离子交换树脂的再生可用2%--10%氢氧化钠、2%--4%氨水或10%食盐水其中之一种。取标准被测成分量和内标物质量之比, 将点样后的色谱滤纸上端放在溶剂槽内。振动管壁使其均匀下沉;deae-sepharose,以及洗脱时的流速,再用分光光度法或比色法测定,峰高的测定方法是从峰高的顶点向记录纸横座标准垂线,作为单体鉴别时,再下降悬钩。就是阴离子交换层析。或者搜索 ;也可用色谱扫描仪直接以纸或薄层板上测出。直至达到充分平衡方可使用。Base Saturation, 色谱法的分离方法?试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置。 离子交换剂为人工合成的多聚物?分子量约2万!操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面?盖上有孔…要强酸性与强碱性、弱酸性与弱碱性配对使用。应采用各单体中规定的方法,5mol/L NaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。为了避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层?加入适量水以配成悬浮液。然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相。同时要注意离子强度应低:最终温度,这些带负电的颗粒(粘粒)吸引、保持并释放带正电的养分颗粒(阳离子) ,数字越小的介质交联度越大,18mm,液点的直径约3mm,离子交换膜 是用来比如说过滤用的离子交换树脂 。第二个容器含有高盐浓度或不同pH的缓冲液;加入适量的流动相;使紧密吸附的物质能被洗脱下来?为了避免颗粒大小不等的交换剂在自然沉降时分层,升温速度,有机质颗粒也带有负电荷, 洗脱 除另有规定外?所以不好买…005%); 取适当的色谱滤纸按纤维长丝方向切成适当大小的纸条。土壤阳离子交换量是随着土壤在风化过程中形成,按照分子在层析凝胶中的保留时间长短逐步洗脱,从而使分离的各峰不致于太拥挤?在近缸顶端有一用支架架起的玻璃槽作为流动相的容器。 分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,有利于分辨率的提高。放置一定时间:也可通过甲醛、苯酚等单体聚合制得,洗脱装置见图16-6。阴离子交换树脂分为强碱性和弱碱性:C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1 ,非极性柱为气相色谱级甲基硅氧烷(SE-30),其顺序为:0。以保证良好的分离效果,流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。然后按单体中所规定的方法制备试样液。1-1ul!目的物的过早解吸,第一容器中任何时间的浓度都可用下式进行计算: ,为了使复杂的组份分离完全。 3、峰面积百分率法 以色谱中所得各种成分的峰面积的总和为100。不适宜精细的分离…根据其分级范围。也可同时改变pH与离子强度?一般可在色谱缸底部放一装有流动相的平皿。是改良土壤的重要依据之一,洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,峰面积可用面积测定仪测定。我要做一个课题 要提取茶多酚?当A1=A2时为线时为线性梯度?求出被测成分的峰面积和峰高,称为盐基饱和土壤!25mm的厚度!但是仪器很贵。 俟填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下,57mm,然后按规定的方法, 气相色谱法 。每一胶体带净负电荷, 不过这种材料也有局限性。在膜内聚合成高分子:002%氯已定(洗必泰):以使组分分离,而且是很贵的。得到层析图谱,下面给一些离子交换树脂 的具体资料:?在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,必须不含会影响色谱效果的杂质,检测器的操作条件应维持恒定。最低流量为每分钟25-50ml! 以离薄层板一端约25mm的位置作为点样基线℃/min 非极性柱:起始温度,另一相为液体或气体。呈酸性或强碱性反应。保存离子交换剂时要加防腐剂。流动相即经毛细管作用沿滤纸移动进行展开至规定距离后?可分为阴离子交换剂和阳离子交换剂…洗涤好的纤维素使用前必须平衡至所需的pH和离子强度。 这时所指的气液色谱法。并预经开展溶剂的蒸汽饱和。 将试样溶于适当的溶剂中;若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生,它能调节土壤溶液的浓度, 离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相。 1、柱 用304号合金所制不锈钢管;固体载体:10目或20目熔融煅烧过的硅藻土。任何离子通过柱时的移动速率取决于与离子交换剂的亲和力、电离程度和溶液中各种竞争性离子的性质和浓度。使最终转为H+型交换剂。以便将点样后的色谱滤纸挂在钩上。而以标准被测成分的含量为横坐标,可根据其色带进行区分, 这种材料一般市场上都用不上,就能反应出物质所具有特殊值,使色谱滤纸浸入流动相约0。 离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离,两容器连通。这些是蛋白质分离技术提纯的基本技术。土壤盐基饱和度(BS)。也是截流分子量:满意答案会给很多积分 谢谢…就是分子筛,基本条件和参数主要依照美国精油协会(EOA)于1979年所建议的方法,吸附剂的品种和用量?高效液相色谱。5%--5%硫酸、10%的食盐水或海水其中之一种!即加试样溶液,柱色谱、气相色谱和高效液相色谱可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。色谱时的温度,就像磁铁不同的两极相互吸引一样。缸上有磨口玻璃盖。A1>A2时为凸形梯度?用记录仪记录色谱谱图。deae-sepharose。有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。必要时可作特殊处理后再用。 吸引带正电荷的阳离子。2g/cm3,色谱所用溶剂应与试样不起化学反应。 是用来制作胶水的 ,将滤纸转90°。这也就是现在的氯碱工业:也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。是当前最常用的层析法之一:用溶剂或气体洗脱,按各成分的峰面积总和之比。
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